A kialakulóban lévő autológ sejtterápia thrombocyta-gazdag plazmával (PRP) kiegészítő szerepet játszhat a különböző regeneratív gyógyászati kezelési tervekben.Világszerte kielégítetlen igény mutatkozik a szövetjavító stratégiák iránt a váz- és izomrendszeri (MSK) és a gerincbetegségekben, az osteoarthritisben (OA), valamint a krónikus összetett és nehezen kezelhető sebekben szenvedő betegek kezelésére.A PRP terápia azon a tényen alapszik, hogy a vérlemezke növekedési faktor (PGF) támogatja a sebgyógyulást és a sebgyógyulási kaszkádot (gyulladás, proliferáció és remodelling).Számos különböző PRP készítményt értékeltek humán, in vitro és állatkísérletek során.Az in vitro és állatkísérletek ajánlásai azonban általában eltérő klinikai eredményekhez vezetnek, mivel a nem klinikai kutatási eredményeket és módszerajánlásokat nehéz humán klinikai kezelésre átültetni.Az elmúlt években előrelépés történt a PRP technológia és a biológiai ágensek fogalmának megértésében, és új kutatási utasításokat és új indikációkat javasoltak.Ebben az áttekintésben megvitatjuk a PRP elkészítésének és összetételének legújabb előrehaladását, beleértve a vérlemezke dózist, a leukocita aktivitást és a veleszületett és adaptív immunszabályozást, az 5-hidroxi-triptamin (5-HT) hatást és a fájdalomcsillapítást.Ezen kívül megvitattuk a gyulladással és angiogenezissel kapcsolatos PRP mechanizmust a szövetjavítás és regeneráció során.Végül áttekintjük egyes gyógyszerek PRP aktivitásra gyakorolt hatását.
Az autológ vérlemezkében gazdag plazma (PRP) az autológ perifériás vér folyékony része a kezelés után, és a vérlemezke-koncentráció magasabb, mint az alapvonal.A PRP terápiát több mint 30 éve alkalmazzák különféle indikációkban, ami nagy érdeklődést mutat az autogén PRP potenciálja iránt a regeneratív gyógyászatban.Az ortopéd biológiai szer kifejezést a közelmúltban vezették be a mozgásszervi (MSK) betegségek kezelésére, és ígéretes eredményeket ért el a heterogén bioaktív PRP sejtkeverékek regenerációs képességében.Jelenleg a PRP-terápia megfelelő kezelési lehetőség klinikai előnyökkel, és a betegek által közölt eredmények biztatóak.A betegek eredményeinek következetlensége és az új felismerések azonban kihívások elé állítottak a PRP klinikai alkalmazásának gyakorlati alkalmazhatóságát.Ennek egyik oka lehet a piacon lévő PRP és PRP típusú rendszerek száma és változékonysága.Ezek az eszközök a PRP gyűjtési mennyiségét és előkészítési sémáját tekintve eltérőek, ami egyedi PRP jellemzőket és biológiai anyagokat eredményez.Ezenkívül a PRP-készítési séma szabványosításával és a klinikai alkalmazásban használt biológiai ágensek teljes jelentésével kapcsolatos konszenzus hiánya következetlen jelentési eredményekhez vezetett.Számos kísérlet történt a PRP vagy vérből származó termékek jellemzésére és osztályozására a regeneratív gyógyászatban.Ezenkívül vérlemezke-származékokat, például humán vérlemezke-lizátumokat javasoltak ortopédiai és in vitro őssejtkutatáshoz.
A PRP-ről szóló első megjegyzések egyike 2006-ban jelent meg. Ennek az áttekintésnek a középpontjában a vérlemezkék funkciója és hatásmechanizmusa, a PRP hatása a gyógyulási kaszkád egyes szakaszaira, valamint a vérlemezkékből származó növekedési faktor központi szerepe áll. különböző PRP indikációkban.A PRP-kutatás korai szakaszában a PRP vagy PRP-gél iránti fő érdeklődés több thrombocyta növekedési faktor (PGF) megléte és specifikus funkciója volt.
Ebben a cikkben részletesen megvitatjuk a különböző PRP részecskestruktúrák és vérlemezke sejtmembrán receptorok legújabb fejlesztéseit, valamint ezek hatását a veleszületett és adaptív immunrendszer immunszabályozására.Ezen túlmenően részletesen tárgyaljuk a PRP kezelés fiolában esetlegesen előforduló egyes sejtek szerepét és a szövetregenerációs folyamatra gyakorolt hatásukat.Ezen túlmenően a PRP biológiai ágenseinek, a vérlemezkék dózisának, a specifikus fehérvérsejtek specifikus hatásainak, valamint a PGF-koncentrációnak és a citokineknek a mezenchimális őssejtek (MSC) táplálkozási hatásaira gyakorolt hatásainak megértésében elért legújabb eredményeket ismertetjük, beleértve a különböző PRP-ket is. sejt- és szöveti környezet sejtjelátvitel után és parakrin hatások.Hasonlóképpen megvitatjuk a gyulladással és angiogenezissel kapcsolatos PRP mechanizmust a szövetek helyreállítása és regenerációja során.Végül áttekintjük a PRP fájdalomcsillapító hatását, egyes gyógyszerek PRP aktivitásra gyakorolt hatását, valamint a PRP és a rehabilitációs programok kombinációját.
A klinikai vérlemezkében gazdag plazmaterápia alapelvei
A PRP készítmények egyre népszerűbbek és széles körben használatosak az orvostudomány különböző területein.A PRP kezelés tudományos alapelve, hogy koncentrált vérlemezkék befecskendezése a sérült helyre számos biológiailag aktív faktor (növekedési faktorok, citokinek, lizoszómák) felszabadulásával elindíthatja a szövetek helyreállítását, új kötőszövetek szintézisét és a vérkeringés rekonstrukcióját. adhéziós fehérjék, amelyek felelősek a hemosztatikus kaszkád reakció megindításáért.Ezenkívül a plazmafehérjék (pl. fibrinogén, protrombin és fibronektin) jelen vannak a thrombocytaszegény plazmakomponensekben (PPP).A PRP koncentrátum serkentheti a növekedési faktorok hiperfiziológiás felszabadulását, hogy elindítsa a krónikus sérülések gyógyulását és felgyorsítsa az akut sérülés helyreállítási folyamatát.A szövetjavítási folyamat minden szakaszában számos növekedési faktor, citokinek és helyi hatásszabályozók segítik elő a legtöbb alapvető sejtfunkciót endokrin, parakrin, autokrin és endokrin mechanizmusokon keresztül.A PRP fő előnyei közé tartozik a biztonság és a jelenlegi kereskedelmi berendezések zseniális előkészítési technológiája, amellyel széles körben alkalmazható biológiai szerek készíthetők.A legfontosabb, hogy a közönséges kortikoszteroidokhoz képest a PRP egy autogén termék, amelynek nincs ismert mellékhatása.Az injektálható PRP-készítmények képletére és összetételére azonban nincs egyértelmű szabályozás, és a PRP összetétele nagymértékben változik a vérlemezkékben, a fehérvérsejt-tartalomban, a vörösvértest-szennyezésben és a PGF-koncentrációban.
PRP terminológia és osztályozás
A szövetek helyreállítását és regenerációját serkentő PRP termékek fejlesztése évtizedek óta a bioanyag- és gyógyszertudomány fontos kutatási területe.A szövetgyógyító kaszkád számos résztvevőt foglal magában, beleértve a vérlemezkéket és növekedési faktoraikat, valamint a citokin granulátumokat, a fehérvérsejteket, a fibrin mátrixot és sok más szinergetikus citokint.Ebben a kaszkádfolyamatban összetett koagulációs folyamat megy végbe, beleértve a vérlemezkék aktiválódását és az azt követő sűrűsödést, valamint α- A vérlemezke-részecskék tartalmának felszabadulását, a fibrinogén (a vérlemezkék által felszabaduló vagy a plazmában szabadon) aggregációját a fibrinhálózatba és a képződést. vérlemezke embólia esetén.
Az „univerzális” PRP a gyógyulás kezdetét szimulálja
Eleinte a „thrombocytában gazdag plazma (PRP)” kifejezést a vértranszfúziós gyógyászatban thrombocyta-koncentrátumnak nevezték, és ma is használják.Kezdetben ezeket a PRP termékeket csak fibrin szövetragasztóként használták, míg a vérlemezkéket csak az erősebb fibrin polimerizáció támogatására használták, hogy javítsák a szövetek lezárását, nem pedig gyógyulást serkentő szerként.Ezt követően a PRP technológiát úgy tervezték, hogy szimulálja a gyógyulási kaszkád beindulását.Ezt követően a PRP technológiát a növekedési faktorok helyi mikrokörnyezetbe való bejuttatásának és kibocsátásának képességén keresztül foglalták össze.Ez a PGF-bejuttatás iránti lelkesedés gyakran elrejti más komponensek fontos szerepét ezekben a vérszármazékokban.Ezt a lelkesedést tovább fokozza a tudományos adatok hiánya, a misztikus hiedelmek, a kereskedelmi érdekek, valamint a szabványosítás és osztályozás hiánya.
A PRP koncentrátum biológiája ugyanolyan összetett, mint maga a vér, és összetettebb lehet, mint a hagyományos gyógyszerek.A PRP termékek élő bioanyagok.A klinikai PRP alkalmazás eredménye a páciens vérének intrinzik, univerzális és adaptív jellemzőitől függ, beleértve a PRP mintában előforduló egyéb sejtkomponenseket és a receptor lokális mikrokörnyezetét, amely lehet akut vagy krónikus állapotú.
A zavaros PRP terminológia és a javasolt osztályozási rendszer összefoglalása
A gyakorló szakembereket, tudósokat és vállalatokat évek óta sújtják a PRP termékek kezdeti félreértései és hibái, valamint a különböző kifejezéseik.Egyes szerzők a PRP-t csak vérlemezkékként határozták meg, míg mások arra hívták fel a figyelmet, hogy a PRP fokozott koncentrációban tartalmaz vörösvértesteket, különféle fehérvérsejteket, fibrint és bioaktív fehérjéket is.Ezért számos különböző PRP biológiai szert vezettek be a klinikai gyakorlatba.Kiábrándító, hogy az irodalomból általában hiányzik a biológiai ágensek részletes leírása.A termék-előkészítés szabványosításának és az azt követő osztályozási rendszer fejlesztésének kudarca a különböző kifejezésekkel és rövidítésekkel leírt PRP termékek nagyszámú használatához vezetett.Nem meglepő, hogy a PRP-készítmények változásai következetlen betegek kimeneteléhez vezetnek.
Kingsley először 1954-ben használta a „vérlemezkében gazdag plazma” kifejezést. Sok évvel később Ehrenfest et al.Javasolták az első három fő változón (vérlemezke-, leukocita- és fibrintartalom) alapuló osztályozási rendszert, és számos PRP terméket négy kategóriába soroltak: P-PRP, LR-PRP, tiszta vérlemezkében gazdag fibrin (P-PRF) és leukocita. gazdag PRF (L-PRF).Ezek a termékek teljesen automatikus zárt rendszerrel vagy manuális protokollal készülnek.Eközben Everts et al.Hangsúlyozták a fehérvérsejtek említésének fontosságát a PRP-készítményekben.Javasolják továbbá a megfelelő terminológia használatát a PRP-készítmények és a vérlemezke gél inaktív vagy aktivált változatainak jelölésére.
Delong és mtsai.PRP osztályozási rendszert javasolt, amelyet trombocitáknak, aktivált fehérvérsejteknek (PAW) neveznek a vérlemezkék abszolút száma alapján, beleértve a négy vérlemezke-koncentráció tartományt.További paraméterek közé tartozik a vérlemezke-aktivátorok használata, valamint a fehérvérsejtek (azaz neutrofilek) jelenléte vagy hiánya.Mishra et al.Hasonló osztályozási rendszert javasolunk.Néhány évvel később Mautner és munkatársai egy kidolgozottabb és részletesebb osztályozási rendszert (PLRA) írtak le.A szerző bebizonyította, hogy fontos az abszolút thrombocytaszám, a fehérvérsejt-tartalom (pozitív vagy negatív), a neutrofil-százalék, a vörösvértestek (pozitív vagy negatív) leírása, valamint az exogén aktiválás alkalmazása.2016-ban Magalon et al.Megjelent a thrombocyta injekció dózisa, a termelés hatékonysága, a kapott PRP tisztasága és az aktiválási folyamat alapján a DEPA osztályozás.Ezt követően Lana és munkatársai bevezették a MARSPILL osztályozási rendszert, amely a perifériás vér mononukleáris sejtjére összpontosít.A Tudományos Szabványügyi Bizottság a közelmúltban a Nemzetközi Trombózis és Hemostázis Társaság osztályozási rendszerének használatát szorgalmazta, amely egy sor konszenzusos ajánláson alapul a thrombocyta-termékek regeneratív gyógyászatban való használatának szabványosítására, beleértve a fagyasztott és felolvasztott vérlemezke-készítményeket is.
A különféle gyakorló orvosok és kutatók által javasolt PRP osztályozási rendszer alapján számos sikertelen kísérlet a klinikusok által használt PRP előállításának, meghatározásának és képletének szabványosítására tisztességes következtetést vonhat le, amely valószínűleg nem fog megtörténni a következő néhány évben. , a klinikai PRP termékek technológiája folyamatosan fejlődik, és a tudományos adatok azt mutatják, hogy különböző PRP készítményekre van szükség a különböző patológiák speciális körülmények között történő kezelésére.Ezért arra számítunk, hogy az ideális PRP gyártás paraméterei és változói a jövőben is növekedni fognak.
A PRP előkészítési eljárás folyamatban van
A PRP terminológiája és a termékleírás szerint több osztályozási rendszert adnak ki a különböző PRP készítményekhez.Sajnos nincs konszenzus a PRP vagy bármely más autológ vér és vérkészítmény átfogó osztályozási rendszerével kapcsolatban.Ideális esetben az osztályozási rendszernek figyelmet kell fordítania a PRP különböző jellemzőire, definícióira és a megfelelő nómenklatúrára, amelyek az adott betegségben szenvedő betegek kezelési döntéseihez kapcsolódnak.Jelenleg az ortopédiai alkalmazások három kategóriába sorolják a PRP-t: tiszta vérlemezkében gazdag fibrin (P-PRF), leukocita-gazdag PRP (LR-PRP) és leukocitahiányos PRP (LP-PRP).Bár specifikusabb, mint az általános PRP termékdefiníció, az LR-PRP és az LP-PRP kategóriákból nyilvánvalóan hiányzik a fehérvérsejt-tartalom specifikussága.Immun- és gazdaszervezet védekező mechanizmusainak köszönhetően a fehérvérsejtek nagymértékben befolyásolták a krónikus szöveti betegségek belső biológiáját.Ezért a specifikus fehérvérsejteket tartalmazó PRP biológiai szerek jelentősen elősegíthetik az immunszabályozást, valamint a szövetek helyreállítását és regenerálódását.Pontosabban, a limfociták bőségesek a PRP-ben, inzulinszerű növekedési faktort termelnek és támogatják a szövetek átépülését.
A monociták és a makrofágok kulcsszerepet játszanak az immunszabályozás folyamatában és a szövetek helyreállításának mechanizmusában.A neutrofilek jelentősége a PRP-ben nem világos.Az LP-PRP-t az első PRP készítményként határozták meg szisztematikus kiértékeléssel, az ízületi OA hatékony kezelési eredményeinek elérése érdekében.Azonban Lana et al.Ellenzik az LP-PRP használatát a térd OA kezelésében, ami azt jelzi, hogy a specifikus fehérvérsejtek fontos szerepet játszanak a szövetregeneráció előtti gyulladásos folyamatban, mivel gyulladást elősegítő és gyulladásgátló molekulákat szabadítanak fel.Azt találták, hogy a neutrofilek és az aktivált vérlemezkék kombinációjának több pozitív hatása van, mint negatívan a szövetek helyreállítására.Arra is rámutattak, hogy a monociták plaszticitása fontos a szövetek helyreállításában a nem gyulladásos és javító funkció szempontjából.
A klinikai kutatásban a PRP előkészítési sémáról szóló jelentés rendkívül következetlen.A legtöbb publikált tanulmány nem javasolta a séma megismételhetőségéhez szükséges PRP-előkészítési módszert.A kezelési javallatok között nincs egyértelmű konszenzus, így nehéz összehasonlítani a PRP-termékeket és a hozzájuk kapcsolódó kezelési eredményeket.A legtöbb jelentett esetben a thrombocytakoncentrációs terápiát a „PRP” kifejezés alá sorolják, még ugyanazon klinikai indikáció esetén is.Egyes orvosi területeken (például OA és tendinosis) előrelépés történt a PRP-készítmények, a bejuttatási útvonalak, a vérlemezke-funkció és más PRP-komponensek változásainak megértésében, amelyek befolyásolják a szövetek helyreállítását és a szöveti regenerációt.Azonban további kutatásokra van szükség ahhoz, hogy konszenzusra jussunk a PRP biológiai ágensekkel kapcsolatos PRP terminológiájával kapcsolatban, bizonyos patológiák és betegségek teljes körű és biztonságos kezelése érdekében.
A PRP osztályozási rendszer állapota
Az autológ PRP bioterápia alkalmazását nehezíti a PRP-készítmények heterogenitása, a következetlen elnevezések és a bizonyítékokon alapuló irányelvek nem megfelelő szabványosítása (vagyis számos előkészítési módszer létezik a klinikai kezelési fiolák előállítására).Megjósolható, hogy a PRP és a rokon termékek abszolút PRP tartalma, tisztasága és biológiai jellemzői nagymértékben változnak, és befolyásolják a biológiai hatékonyságot és a klinikai vizsgálatok eredményeit.A PRP előkészítő eszköz kiválasztása bevezeti az első kulcsváltozót.A klinikai regeneratív gyógyászatban a szakemberek két különböző PRP előkészítő berendezést és módszert használhatnak.Egy készítmény egy szabványos vérsejt-leválasztót használ, amely a saját maga által gyűjtött teljes vért működteti.Ez a módszer folyamatos áramlású centrifuga dobos vagy tárcsás elválasztási technológiát, valamint kemény és lágy centrifugálási lépéseket alkalmaz.A legtöbb ilyen eszközt sebészetben használják.Egy másik módszer a gravitációs centrifugális technológia és berendezések alkalmazása.A nagy G-erejű centrifugálást az ESR sárga rétegének a vérlemezkéket és fehérvérsejteket tartalmazó véregységtől való elkülönítésére használják.Ezek a koncentrációs eszközök kisebbek, mint a vérsejt-leválasztók, és az ágy mellett is használhatók.Különbség ģ – Az erő és a centrifugálási idő jelentős különbségeket okoz az izolált vérlemezkék hozamában, koncentrációjában, tisztaságában, életképességében és aktivált állapotában.Ez utóbbi kategóriában sokféle kereskedelmi PRP előkészítő berendezés használható, ami további változásokat eredményez a terméktartalomban.
A PRP előkészítési módszerével és validálásával kapcsolatos konszenzus hiánya továbbra is a PRP-kezelés következetlenségéhez vezet, és óriási különbségek vannak a PRP előkészítésében, a minta minőségében és a klinikai eredményekben.A meglévő kereskedelmi PRP berendezéseket a saját gyártó előírásai szerint ellenőrizték és regisztrálták, amely megoldja a különböző változókat a jelenleg elérhető PRP berendezések között.
Ismerje meg a vérlemezke dózisát in vitro és in vivo
A PRP és más thrombocyta koncentrátumok terápiás hatása a szövetek helyreállításában és regenerációjában szerepet játszó különböző tényezők felszabadulásából fakad.A vérlemezkék aktiválódása után a vérlemezkék trombocita trombust képeznek, amely ideiglenes extracelluláris mátrixként szolgál a sejtproliferáció és -differenciálódás elősegítésére.Ezért jogos azt feltételezni, hogy a nagyobb thrombocytadózis a vérlemezke bioaktív faktorok magasabb lokális koncentrációjához vezet.A vérlemezkék dózisa és koncentrációja, valamint a felszabaduló thrombocyta bioaktív növekedési faktor és gyógyszer koncentrációja közötti összefüggés azonban ellenőrizhetetlen lehet, mivel az egyes betegeknél szignifikáns különbségek vannak a kiindulási thrombocytaszámban, illetve a PRP-készítési módszerek között.Hasonlóképpen, a PRP plazmarészében számos, a szövetjavító mechanizmusban szerepet játszó vérlemezke növekedési faktor is jelen van (például májnövekedési faktor és inzulinszerű növekedési faktor 1).Ezért a nagyobb vérlemezke-dózis nem befolyásolja e növekedési faktorok javítási potenciálját.
Az in vitro PRP-kutatás nagyon népszerű, mivel ezekben a vizsgálatokban a különböző paraméterek pontosan szabályozhatók, és az eredmények gyorsan elérhetők.Számos tanulmány kimutatta, hogy a sejtek dózisfüggő módon reagálnak a PRP-re.Nguyen és Pham kimutatta, hogy a GF nagyon magas koncentrációja nem feltétlenül kedvez a sejtstimulációs folyamatnak, ami kontraproduktív lehet.Egyes in vitro vizsgálatok kimutatták, hogy a magas PGF-koncentráció káros hatásokkal járhat.Ennek egyik oka a sejtmembrán receptorok korlátozott száma lehet.Ezért, ha a PGF-szint túl magas a rendelkezésre álló receptorokhoz képest, azok negatív hatással lesznek a sejtműködésre.
A vérlemezkekoncentráció adatainak jelentősége in vitro
Bár az in vitro kutatásnak számos előnye van, vannak hátrányai is.In vitro, a szövetszerkezet és a sejtszövet miatt bármely szövetben számos különböző sejttípus közötti folyamatos kölcsönhatás miatt nehéz in vitro replikációt végezni egy kétdimenziós egyetlen tenyésztési környezetben.A sejtsűrűség, amely befolyásolhatja a sejtjel-útvonalat, általában kevesebb, mint a szöveti állapot 1%-a.A kétdimenziós tenyésztőedény-szövet megakadályozza, hogy a sejtek extracelluláris mátrixnak (ECM) legyenek kitéve.Ezenkívül a tipikus tenyésztési technológia a sejthulladék felhalmozódását és a folyamatos tápanyag-fogyasztást eredményezi.Ezért az in vitro tenyésztés különbözik bármely steady-state állapottól, a szöveti oxigénellátástól vagy a táptalaj hirtelen cseréjétől, és egymásnak ellentmondó eredményeket publikáltak, összehasonlítva a PRP klinikai hatását specifikus sejtek, szövettípusok és vérlemezkék in vitro vizsgálatával. koncentrációk.Graziani és mások.Megállapítást nyert, hogy in vitro a legnagyobb hatást az oszteoblasztok és fibroblasztok proliferációjára a kiindulási érték 2,5-szeresét meghaladó PRP vérlemezke-koncentráció mellett érte el.Ezzel szemben a Park és munkatársai által szolgáltatott klinikai adatok azt mutatták, hogy a gerinc fúzióját követően a PRP vérlemezkék szintjét az alapvonalnál több mint ötszörösére kell növelni ahhoz, hogy pozitív eredményeket érjünk el.Hasonló ellentmondásos eredményekről számoltak be az in vitro in vitro proliferációs adatok és a klinikai eredmények között.
(A cikk tartalmát újranyomtatjuk, és nem vállalunk semmilyen kifejezett vagy hallgatólagos garanciát a cikkben szereplő tartalom pontosságáért, megbízhatóságáért vagy teljességéért, és nem vállalunk felelősséget a cikkben foglalt véleményért, kérjük, értse meg.)
Feladás időpontja: 2023-01-01